Formation LC / MS

Appréhender la méthode de dosage adaptée

• Mettre en œuvre une méthode de dosage par encadrement afin de déterminer la concentration d’un analyte par comparaison avec des standards encadrants 
• Réaliser un dosage par ajout dosé pour corriger les effets de matrice et améliorer l’exactitude des résultats 
• Appliquer une stratégie d’étalonnage externe ou interne  

Définitions et paramètres de validation

• Définir et distinguer la spécificité, la sensibilité, la précision, l’exactitude et la robustesse afin d’évaluer la performance analytique d’une méthode 
• Déterminer les paramètres LOD, LOQ, LLOQ et ULOQ  
• Mettre en place l’utilisation de standards et d’échantillons de contrôle qualité (QC)  

Mettre en place une optimisation de la méthode LC/MS – Source d’ionisation

• Choisir le mode d’ionisation le plus adapté en fonction des propriétés physico-chimiques de l’analyte 
• Expliquer et maîtriser le principe de l’Electrospray (ESI)  
• Décrire et exploiter le principe de l’APCI pour l’analyse des composés moyennement polaires et moins thermolabiles 
• Comprendre et appliquer le principe de l’APPI pour améliorer l’ionisation des composés peu polaires 

Mettre en place une optimisation de la méthode LC/MS – Séparation chromatographique

• Sélectionner la phase mobile en fonction des propriétés de solubilité et d’ionisation des analytes
• Choisir la phase stationnaire afin d’optimiser la séparation chromatographique et la résolution des composés 
• Optimiser le gradient d’élution pour : 
  • Améliorer la séparation 
  • Réduire le temps d’analyse 
  • Affiner la forme des pics 

Maîtriser la courbe de calibration – Instrumentation et acquisition

• Comparer les performances d’un analyseur quadripolaire (Quad) et d’un analyseur temps de vol (ToF) pour la quantification 
• Différencier les modes d’acquisition SIM et MRM  
• Ajuster le dwell time et le duty cycle pour maximiser le nombre de points par pic 

Maîtriser la courbe de calibration – Validation

• Définir et appliquer les critères d’acceptation d’une courbe de calibration selon les recommandations réglementaires 
• Évaluer la linéarité et choisir un modèle de pondération adapté afin d’améliorer la justesse sur toute la gamme de concentration 
• Comparer et interpréter les différences entre LOD et LOQ dans le cadre de la validation de méthode 

Gérer les problématiques courantes en LC/MS 

• Identifier et corriger les causes de déformation des pics chromatographiques 
• Prévenir les phénomènes d’adsorption et de carry over 
• Analyser et résoudre les problèmes de non-linéarité des courbes de calibration 
• Distinguer et évaluer l’effet matrice qualitatif et quantitatif  
• Sélectionner un étalon interne approprié